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在高效液相色譜檢測(cè)中，對(duì)照品純度直接影響定量分析的準(zhǔn)確性，在售后工作中經(jīng)常遇見因?qū)φ掌芳兌犬惓?dǎo)致數(shù)據(jù)偏差的案例?，F(xiàn)從專業(yè)角度剖析原因及應(yīng)對(duì)策略：

1，檢測(cè)波長(zhǎng)選擇差異

原因：雜質(zhì)峰與對(duì)照品峰有不同的紫外吸收特征，在不同波長(zhǎng)下呈現(xiàn)不同的色譜圖。
解決方案：選擇對(duì)照品與雜質(zhì)具有相似吸收特征的波長(zhǎng)，純度結(jié)果會(huì)更趨近真實(shí)值（如示圖選擇255nm檢測(cè)）。

2，空白干擾
原因：部分溶劑在特定波長(zhǎng)下有紫外吸收，特別是末端波長(zhǎng)下?；蛉軇┍晃廴疽矔?huì)出現(xiàn)一些雜峰，導(dǎo)致對(duì)照品檢測(cè)純度不夠。
解決方案：檢測(cè)對(duì)照品時(shí)用相同色譜方法檢測(cè)空白溶劑，扣除空白溶劑中的峰即可排除空白干擾。

3，對(duì)照品溶液不穩(wěn)定
原因：部分對(duì)照品固體狀態(tài)時(shí)穩(wěn)定，但是溶解后卻容易降解（如在溶液中存在互變異構(gòu)或發(fā)生水解等化學(xué)反應(yīng)）。
解決方案：找到不穩(wěn)定的原因，并隔絕不穩(wěn)定因素（如現(xiàn)配現(xiàn)測(cè)，或更換適宜的溶劑。）

4，溶解性影響
原因：部分對(duì)照品在當(dāng)前溶劑下溶解性較差，在溶解時(shí)對(duì)照品或其雜質(zhì)溶解不充分，從而導(dǎo)致純度異常。
解決方案：更換溶解性更好的溶劑、降低配制濃度或添加助溶劑（DMSO或DMF）。
5，樣品污染
原因：對(duì)照品可能在保存期間、運(yùn)輸期間、取樣期間、甚至上機(jī)檢測(cè)期間被不干凈的器具、器皿、溶劑等污染，導(dǎo)致純度不夠。
解決方案：盡量避免各個(gè)環(huán)節(jié)污染，如使用干凈的器皿、新開封的溶劑，且檢測(cè)前確保色譜柱、儀器系統(tǒng)已經(jīng)完全被沖洗干凈（可先進(jìn)空白溶劑以確證）。
6，色譜柱問題
原因：色譜柱柱效下降或色譜柱不適用
解決方案：測(cè)試柱效，查看柱效參數(shù)是否符合要求。如為柱效下降則更換新的色譜柱；如為色譜柱不適用，可選擇具更高選擇性的色譜柱，如HILIC、手性柱等。

7，溶劑效應(yīng)
原因：對(duì)照品溶劑強(qiáng)度大于流動(dòng)相強(qiáng)度，可造成的色譜峰變形、分叉或出現(xiàn)異常峰。
解決方案：使用與流動(dòng)相初始比例極性相當(dāng)?shù)娜軇┤芙鈱?duì)照品、或降低進(jìn)樣量。

8，樣品過載
原因：對(duì)照品濃度配制過高，超過色譜柱的載樣量，也可能使檢測(cè)器響應(yīng)過載，導(dǎo)致純度結(jié)果異常。
解決方案：降低對(duì)照品濃度。
9，對(duì)照品發(fā)生降解
原因：對(duì)照品存儲(chǔ)條件不當(dāng)，如光照、溫度、濕度或密封性等不適宜會(huì)導(dǎo)致降解。
解決方案：使用惰性氣體保護(hù)，密封包裝，避光保存于-20℃或2-8℃環(huán)境（視化合物性質(zhì)而定）。對(duì)使用者而言，收到對(duì)照品的第一時(shí)間按產(chǎn)品說明書保存對(duì)照品。
10，基線噪音過大
原因：當(dāng)基線噪音過大時(shí)，易將溶劑峰、系統(tǒng)峰錯(cuò)誤積分計(jì)入雜質(zhì)。
解決方案：排除儀器系統(tǒng)干擾和流動(dòng)相的影響，如檢查檢測(cè)器氘燈能量、流通池污染或氣泡、泵污染或泵穩(wěn)定性、溫度穩(wěn)定性、流動(dòng)相氣泡或均勻性等。
11，洗脫程序不適用
原因：某些極性非常相近的雜質(zhì)在色譜條件下未分離，如異構(gòu)體雜質(zhì)。
解決方案：優(yōu)化洗脫程序（如改為梯度洗脫、延長(zhǎng)洗脫時(shí)間、調(diào)整有機(jī)相比例等）。
12，檢測(cè)器不適用
原因：化合物因其不同的結(jié)構(gòu)特征，具有不同紫外特征吸收，也適宜不同的檢測(cè)器（或檢測(cè)波長(zhǎng)），因而可能出現(xiàn)不出峰、峰面積偏低、純度偏低等情況。
解決方案：選擇適宜的檢測(cè)器，如沒有紫外吸收的化合物可以選擇蒸發(fā)光檢測(cè)器或者示差折光檢測(cè)器，或選擇適宜的檢測(cè)波長(zhǎng)（參考第一條）。